多通道多肽合成儀助力阿爾茨海默藥物開發(fā)

更新時間：2025-01-08

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人β-淀粉樣蛋白1-42（圖1）是阿爾茨海默癥(AD)患者大腦沉積斑塊的主要成分。AD病理學、診斷工具和潛在藥物的日常研究需要不間斷地供應β-淀粉樣蛋白。但據(jù)報道，由于C末端的高疏水性，以及序列預沉積導致的樹脂上聚集，β-淀粉樣蛋白(1-42)難以通過傳統(tǒng)的固相多肽合成(SPPS)制備。β-淀粉樣蛋白自動合成的最新進展包括紅外加熱和新的偶聯(lián)試劑組合，能以更短的循環(huán)時間更好地合成疑難疏水肽。本文在Symphony^® X 24通道多肽合成儀平行上探索了不同合成方法下β-淀粉樣蛋白的合成效率。

多通道多肽合成儀助力阿爾茨海默藥物開發(fā)

合成方法

使用Rink Amide ChemMatrix™ (0.47 mmol/g)和R TentaGel™樹脂(0.19 mmol/g)、PurePep™試劑：HDMA/OxymaPure™或HDMC/OxymaPure和DIPEA和預裝Fmoc氨基酸(1:1:1:2)，在Symphony^® X合成儀上，按10倍過量、規(guī)模50 µmol的條件合成多肽。測試了兩種合成方法：

方法A：脫保護2 x 3 min，偶聯(lián)2 x 5 min，25°C。

方法B：脫保護2 x 30 s，90°C ，偶聯(lián)2 x 1 min，90°C，紅外加熱。

結果

Symphony X多肽合成儀功能靈活，可同時測試5種獨立的β-淀粉樣蛋白合成條件。HDMA（表1）和HDMC（表2）各與OxymaPure試劑組合，使用Rink ChemMatrix或R TentaGel樹脂，按較慢的方法A合成β-淀粉樣蛋白，所得粗品的純度相近。最高純度來自HDMA/OxymaPure試劑和Rink Amide ChemMatrix樹脂的搭配（圖2）。

升高溫度(90°C)和加快反應（方法B）后，HDMA/OxymaPure/DIPEA試劑與Rink Amide ChemMatrix樹脂搭配的粗品純度為33.9%。加快方法+高溫+HDMA搭配的合成純度與慢方法（表1）的相近。

表1.使用HDMA/OxymaPure/DIPEA試劑按方法A合成β-淀粉樣蛋白，所得粗品純度和產率。